A lente, caracterizada pela sua clareza óptica, é um elemento chave no complexo campo de visão, permitindo-nos perceber com precisão o mundo que nos rodeia. No centro da manutenção desta clareza óptica estão as conexinas (Cxs), moléculas importantes que coordenam a comunicação entre as células do cristalino. Recentemente, os pesquisadores revelaram um protocolo inovador projetado para alterar a função dos hemicanais de conexina (HC) nas células primárias da fibra do cristalino de galinha. Este procedimento inovador fornece informações sobre a potencial melhoria da saúde do cristalino através da aplicação do vírus da leucocitose aviária. O acordo marca um grande avanço na compreensão dos mecanismos complexos que controlam a transparência das lentes, prometendo avanços na elasticidade ocular e na clareza da visão.
Os investigadores principais Jean Jiang, Ph.D., e Yu Du, Ph.D., e seus colegas, Francisca Acosta, Ph.D., Jianping Zhang, Ph.D., Yuxin Tong, Yumeng Quan e Sumin Gu, Ph.D., são todos do Centro de Ciências da Saúde da Universidade do Texas. Eles dissecaram as lentes dos embriões de galinha e extraíram as células das fibras das lentes. Eles então cultivaram células vivas da fibra do cristalino até que as células estivessem prontas para serem infectadas com o vírus da leucocitose aviária, que alterou a expressão do hemicanal Cx50 e subsequentemente confirmou a ativação do HC nas células do cristalino. Finalmente, determinaram a morte celular e realizaram análises estatísticas. Seu trabalho foi publicado na revista STAR Protocols, revisada por pares.
O protocolo é cuidadosamente delineado desde a incubação dos ovos até os métodos de processamento e detecção de células e análise estatística, proporcionando uma visão dos mecanismos complexos que protegem a transparência da lente. Além da simples elucidação, é promissor para avaliar fatores relacionados ao metabolismo das células das fibras do cristalino, que são essenciais para proteger as células das fibras do cristalino do estresse oxidativo e representam uma base para futuras pesquisas sobre a saúde do cristalino. Através dos seus esforços, embarcamos numa jornada para alcançar uma visão mais clara e uma melhor recuperação ocular. “Este protocolo envolve o uso de células do cristalino primário após alteração da expressão de Cx50 HC e testes de morte celular após H2oxigênio2 tratar. É digno de nota que a função da junção comunicante (GJ) não pôde ser detectada devido à morfologia celular e aos padrões de crescimento neste cenário. Yu Du observou: “Este protocolo pode estudar a função do HC e é capaz de detectar a apoptose/necrose das células da fibra do cristalino e as alterações na glutationa intracelular (GSH) causadas por alterações na função do HC. Em resumo, os principais pesquisadores, Dr. Jiang e Yu Du, e seus colegas se propuseram a explorar o papel fundamental da Conexina na manutenção da transparência do cristalino e na manutenção da clareza visual. Por meio de experimentos meticulosos, eles desenvolveram um método para operar o protocolo Connexin. Seu estudo persistente de hemicanais dentro células de fibra de cristalino de galinha usando o vírus da leucocitose aviária fornecem informações valiosas sobre estratégias de melhoria da saúde do cristalino, e seu trabalho não apenas elucida os mecanismos complexos que controlam a transparência do cristalino, mas também sugere caminhos potenciais para combater o estresse oxidativo.
Referência do diário
Du Yu, Francesca M. Acosta, Zhang Jianping, et al. “Protocolo para alterar a função do hemicanal da conexina em células primárias de fibra do cristalino de galinha usando infecção retroviral RCAS (A) de alto título.” Protocolos STAR, 2023.
Número digital: https://doi.org/10.1016/j.xpro.2023.102564.
Sobre o autor
Dr.Jean X. Jiang
Professor e Zachry Distinguished University Chair em Pesquisa do Câncer,
Diretor Adjunto, Departamento de Bioquímica e Biologia Estrutural
UT Saúde San Antonio
Dr. Jiang recebeu seu Ph.D. em bioquímica pela Universidade Estadual de Nova York em Stony Brook e recebeu treinamento de pós-doutorado em biologia celular na Harvard Medical School. Ela faz parte do corpo docente da UT Health San Antonio desde 1997. Seus principais projetos de pesquisa se concentram em canais de conexinas, mecanismos de sinalização celular em vários tecidos e células e no desenvolvimento de terapêuticas para tratar câncer e doenças neurológicas. Dr. Jiang é autor de mais de 180 artigos e possui diversas patentes publicadas e emitidas. Sua pesquisa foi financiada por diversas agências federais e privadas. Ela recebeu o prêmio Presidential Distinguished Research Scholar da UT Health e foi membro eleito da Associação Americana para o Avanço da Ciência (AAAS) e da Academia Nacional de Inventores (NAI).
Dra. Francesca Acosta
NIH NIDDK F32 Pós-doutorado
Departamento de Bioquímica e Biologia Estrutural
UT Saúde San Antonio
Acosta se formou na Rice University em 2015 com bacharelado (BS) em bioengenharia e posteriormente continuou o treinamento pós-bacharelado como parte do Programa de Treinamento em Pesquisa Pós-Bacharelado da NIH Kansas University (KU PREP) antes de viajar para San Antonio em maio para concluir seu doutorado (Ph.D.) 2020 na Universidade do Texas em San Antonio (UTSA) e no Programa Conjunto de Pós-Graduação em Engenharia Biomédica da UTHSA. Seus interesses de pesquisa combinam engenharia, ciência básica e pesquisa translacional nas áreas de metabolismo, músculo-esquelético, diabetes, envelhecimento, biologia do câncer e engenharia biomédica/medicina regenerativa.
Du Yu, MD, PhD
pesquisador
Departamento de Bioquímica e Biologia Estrutural
UT Saúde San Antonio;
médico assistente
oftalmologia,
Segundo Hospital da Universidade de Lanzhou e Escola Clínica de Medicina
Dr. Du Yu se formou na Universidade de Lanzhou. De setembro de 2019 a setembro de 2021, conduziu treinamento conjunto de doutorado no Centro Médico da Universidade do Texas, nos Estados Unidos; durante este período, ele realizou sistematicamente pesquisas sobre a regulação da homeostase redox do cristalino por canais / hemicanais de junções comunicantes de células do cristalino no laboratório do Dr. Ele é especialista no diagnóstico e tratamento de diversas doenças oculares comuns, principalmente envolvido no diagnóstico e tratamento de ambliopia, estrabismo, optometria e baixa visão.
